各省、自治區(qū)、直轄市獸醫(yī)（畜牧、農(nóng)牧、農(nóng)業(yè)）廳（局、辦）：

　　根據(jù)《獸藥管理?xiàng)l例》和《關(guān)于加強(qiáng)獸藥殘留檢測(cè)試劑（盒）管理的通知》（農(nóng)辦醫(yī)[2005] 3號(hào)），我部組織制定了《獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑（盒）備案審查技術(shù)資料要求》和《獸藥殘留試劑（盒）備案參考評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)》，現(xiàn)予發(fā)布，請(qǐng)各有關(guān)部門(mén)遵照?qǐng)?zhí)行。此前發(fā)布的獸藥殘留檢測(cè)試劑（盒）備案技術(shù)資料要求與本通知不符的，以本通知為準(zhǔn)。

　　附件：1.獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑（盒）備案審查技術(shù)資料要求

　　　　　2.獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑（盒）備案參考評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　二〇〇五年六月二十三日

　　附件1：

獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑盒備案審查技術(shù)資料要求

　　一、產(chǎn)品研制概況

　　（一）立項(xiàng)依據(jù)和國(guó)內(nèi)外研制概況

　?。ǘ┊a(chǎn)品研制概況

　　1、主要材料制備方法概述

　　2、檢測(cè)方法的建立

　　3、樣品提取方法的研究情況

　　4、與理化方法的比較

　　如無(wú)理化方法則選用代表性進(jìn)口試劑盒比較

　?。ㄈ?fù)核試驗(yàn)報(bào)告

　　至少提供2個(gè)復(fù)核試驗(yàn)單位的報(bào)告。

　　二、產(chǎn)品生產(chǎn)工藝

　　1、生產(chǎn)過(guò)程

　　2、工藝流程

　　三、產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

　?。ㄒ唬┵|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

　　1、物理性狀描述

　　2、靈敏度

　　3、特異性

　　陰性和具有參考意義濃度的陽(yáng)性樣品測(cè)定結(jié)果范圍。

　　4、精密度

　　選用標(biāo)準(zhǔn)曲線50%抑制濃度（IC50）附近濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液重復(fù)測(cè)定。

　　5、適用范圍

　　6、用法及結(jié)果判定

　　7、注意事項(xiàng)

　　8、貯藏條件和保質(zhì)期

　　9、規(guī)格

　?。ǘ┵|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說(shuō)明

　　質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)各項(xiàng)制定的依據(jù)。

　　四、產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)

　　2~8℃放置，分別于0、1、2、3個(gè)月測(cè)定，以后可根據(jù)保存期，每隔3個(gè)月測(cè)定1次。

　　推薦進(jìn)行37℃加速和凍融的穩(wěn)定性試驗(yàn)。

　　測(cè)定項(xiàng)目為0標(biāo)準(zhǔn)液的OD值、IC50、代表濃度的添加回收率，直到測(cè)定值

　　超過(guò)允許范圍為止。

　　五、使用說(shuō)明書(shū)

　　1、試驗(yàn)原理

　　2、使用范圍

　　3、交叉反應(yīng)

　　4、使用單位需自備的設(shè)備及試劑

　　5、提供的材料與試劑

　　6、溶液的配制

　　7、樣品的前處理方法

　　8、檢測(cè)步驟

　　9、結(jié)果判定

　　10、檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度

　　11、注意事項(xiàng)

　　12、貯藏條件和保存期

　　13、供應(yīng)商名稱(chēng)、地址

　　六、試劑盒的技術(shù)參數(shù)

　　1、標(biāo)準(zhǔn)曲線

　　2、檢測(cè)限和定量限

　　3、臨界值

　　4、精密度和準(zhǔn)確度

　　5、交叉反應(yīng)

　　附件2：

試劑盒備案參考評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

　　1、標(biāo)準(zhǔn)曲線

　　定量方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個(gè)濃度組成，測(cè)定次數(shù)不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。

　　定性方法：工作濃度范圍通過(guò)陰性、臨界值濃度和陽(yáng)性的樣品測(cè)定來(lái)確定，每個(gè)濃度重復(fù)不少于5次，濃度與響應(yīng)值之間應(yīng)有一定的關(guān)系。

　　2、檢測(cè)限和定量限

　　檢測(cè)限：20份空白樣品測(cè)定均值加3倍標(biāo)準(zhǔn)差。

　　定量限：應(yīng)大于標(biāo)準(zhǔn)曲線中最低濃度點(diǎn)。對(duì)于定量方法，應(yīng)對(duì)該濃度樣品至少測(cè)定6次進(jìn)行驗(yàn)證，而不能通過(guò)外延法推斷。

　　3、臨界值（cut-off值）的確定

　　對(duì)于有最高殘留限量的藥物，檢測(cè)方法的臨界值為20份添加MRL濃度的樣品重復(fù)3次測(cè)定的均值減去1.64倍標(biāo)準(zhǔn)差，即95%置信限處。

　　對(duì)于禁用藥物，檢測(cè)方法的臨界值為定量限，該值應(yīng)達(dá)到公認(rèn)的指標(biāo)。

　　4、精密度和準(zhǔn)確度

　　對(duì)于有最高殘留限量的藥物，添加濃度為MRL及MRL上下各一個(gè)濃度；對(duì)于禁用藥物，添加濃度為定量限和2倍定量限，每個(gè)添加濃度至少測(cè)定5個(gè)平行樣，并至少進(jìn)行3批實(shí)驗(yàn)（不同檢測(cè)日期，不同標(biāo)準(zhǔn)曲線，不同批次試劑盒）。

　　（1）準(zhǔn)確度：回收率范圍大于40%或符合相應(yīng)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

　　（2）精密度：以變異系數(shù)表示。

　　批內(nèi)變異系數(shù)：每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25%，對(duì)于禁用藥物小于或等于30%。

　　批間變異系數(shù)：所有樣品之間的變異系數(shù)值小于或等于30%，對(duì)于禁用藥物小于或等于40%。

　　定性方法：陰性和陽(yáng)性樣品各測(cè)定不少于50份，確定假陽(yáng)性率和假陰性率。

　　5、交叉反應(yīng)

　　試劑盒與待檢藥物類(lèi)似物、代謝物或共同存在的藥物測(cè)定交叉反應(yīng)率。

　　6、保存期

　　保存期通過(guò)保存條件的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果確定。

　　7、復(fù)核試驗(yàn)

　　復(fù)核試驗(yàn)主要內(nèi)容應(yīng)包括：

　?。?）定量方法：檢測(cè)限、IC50以及至少兩個(gè)添加濃度的準(zhǔn)確度和精密度，并與理化方法（或與具代表性進(jìn)口試劑盒）比較。

　?。?）定性方法：檢測(cè)限、假陽(yáng)性率和假陰性率。